Серологические реакции при сифилисе. Какие бывают анализы на сифилис

Чем раньше и точнее выявлен сифилис — тем проще лечение и выше вероятность, что для пациента оно пройдет гладко.

Цель для всех лабораторных исследований одна: поставить диагноз однозначно и быстро. Но ни один из современных высокотехнологичных анализов на сифилис не дает результат однозначно и с точностью 100%. Старые методы совершенствуются, новые изобретаются, но до сих пор в клинической практике врачам всегда приходится использовать комбинацию из нескольких разных анализов на сифилис. Полагаться на результат какого-то одного медики не могут.

Анализов на сифилис существует столько разновидностей, что с ходу разобраться во всех аббревиатурах невозможно:

Впервые выявить болезнь с помощью лабораторной реакции удалось в 1906 году. Это заслуга немецкого ученого Августа Вассермана, в честь которого реакция и названа. С тех пор прошло много времени, метод устарел и на практике не используется, но до сих пор диагностика сифилиса прочно ассоциируется именно с анализом РВ.

Пройти исследование на сифилис может потребоваться человеку по самым разным причинам.
Самая первая причина, что приходит в голову — при подозрении наличия инфекции, и на практике она не самая распространенная. В этом случае важно понимать, что у инфекции есть инкубационный период (от момента заражения до формирования твердого шанкра) и первичный серонегативный период (твердый шанкр в первые три недели) — в это время анализы будут отрицательными. Поэтому если опасения серьезные — анализы повторяют через несколько недель.

Чаще провериться на сифилис требуется людям, никакой инфекции не подозревающим. Обычно это происходит при приеме на работу (анализ входит в медицинскую книжку) и при периодических диспансеризациях (мед. осмотрах). Еще в обязательном порядке кровь на сифилис сдают:

доноры,
женщины в первые недели беременности — дважды, при поставке на учет в женскую консультацию и в роддоме за несколько недель до родов,
пациенты перед операцией или любыми другими медицинскими инвазивными вмешательствами (ФГДС , бронхоскопия и т.д.).

В конце статьи мы ответили на самые частые вопросы людей, столкнувшихся с диагностикой сифилиса. Нет времени читать подробности про методы исследований — .

Все виды исследований на сифилис

Существует 2 основные группы методов исследования на сифилис: прямые и непрямые.

Прямой метод — это исследование, при котором в биоматериале ищут саму инфекцию — отдельных представителей возбудителя целиком, или их куски — ДНК .
Непрямые методы (серологические реакции) — это исследование, при котором в крови пытаются выявить антитела к возбудителю сифилиса. Логика такова: если найден иммунный ответ, характерный для какой-то инфекции — значит, есть и сама инфекция, этот иммунный ответ вызвавшая.

Прямые методы, — самые достоверные: если бактерия «поймана с поличным», то наличие болезни считается доказанным. Но бледную трепонему поймать сложно, и отрицательные результаты тестов наличие инфекции не исключают. Эти исследования имеет смысл проводить только при наличии высыпаний и только при ранней форме сифилиса — до двух лет болезни. Т.е. определить скрытый сифилис или поздние его формы этими методами нельзя, поэтому в клинической практике они используются редко и только для подтверждения других анализов.

К прямым методам относятся: Темнопольная микроскопия, Заражение лабораторных животных, ПЦР .

Темнопольная микроскопия (ТПМ) — исследование бледных трепонем под микроскопом. Материал берется из твердого шанкра или высыпаний. Метод дешевый и быстрый, и выявляет сифилис уже в самом начале первичного периода, когда анализы крови на сифилис еще отрицательны. Но бактерии, в высыпаниях находящиеся в небольшом количестве, могут легко не попасть в соскоб. Плюс бледные трепонемы можно легко перепутать с другими обитателями ротовой полости, анального канала и пр.
Заражение лабораторных животных — это очень дорогой и кропотливый метод, применяется только в исследовательской практике.
ПЦР — относительно новый метод, в нем ищут ДНК инфекции. Для исследования годится любая ткань или жидкость, в которой могут содержаться бледные трепонемы: кровь, моча, секрет простаты, эякулят, соскоб с высыпаний на коже, из мочеполового тракта, ротоглотки или конъюнктивы. Анализ очень чувствительный и специфичный. Но сложный и дорогой. Назначают его в случае сомнительных результатов других анализов.

Непрямые методы, они же серологические реакции, — основа лабораторного исследования сифилиса. Именно эти методы используют для массового скрининга населения, для утверждения диагноза и контроля лечения. Непрямые методы исследования разделяются на нетрепонемные и трепонемные тесты.

Нетрепонемные тесты заметно дешевле. Для их проведения используют не сам белок-антиген, специфичный для сифилитической трепонемы, а его замену — кардиолипиновый антиген. Эти тесты являются высочувствительными, но слабоспецифичными. Это означает, что такие тесты укажут всех, у кого имеется и сифилис и даже больше: у здоровых людей также могут быть ложноположительные результаты. Используются для массового скриннинга населения, но в случае положительного результата обязательно требуют подтверждения более специфичными тестами — трепонемными. Еще нетрепонемные тесты очень полезны в оценке эффективности лечения: при эффективном лечении объем антител в крови снижается, и соответственно снижается их титр (об этих титрах чуть дальше расскажем подробнее). Наиболее достоверным результат этих нетрепонемных тестов будет во время раннего сифилиса, особенно во вторичный период.

К нетрепонемным тестам относятся:

Реакция Вассермана ( , она же РВ , или РСК) — уже устарела и не используется, но из-за прочной ассоциации с болезнью так часто называют любые тесты для скрининга населения на сифилис. Если видите в направлении от врача запись «анализ РВ » — не смущайтесь, в лаборатории наверняка все поймут правильно и будут делать RPR .
Реакция микропреципитации (МР , она же РМП) — это простой и дешевый тест на определение сифилиса. Ранее использовался в качестве основного нетрепонемного теста, но сейчас уступил место более удобному и объективному RPR -тесту.
Быстрый плазмареагиновый тест (RPR -тест) — быстрый простой и удобный тест для массового обследования населения и контроля лечения. Является основным нетрепонемным тестом, применяющимся в России и за рубежом.
TRUST — это более современная модификация RPR -теста. По-другому его обозначают, как RPR -тест с толудиновым красным. В России используется лишь в небольшом количестве лабораторий.
VDRL — этот анализ по достоверности результатов аналогичен РМП , и также уступает RPR . В России он не нашел широкого применения.
USR -тест (или его модификация — RST -тест) — более усовершенствованный VDRL тест, однако в России также применяется крайне редко.

Трепонемные тесты проводятся с трепонемными антигенами. Они более специфичны, и потому тщательнее отсеивают здоровых от больных. Но чувствительность их ниже, и такие анализы могут пропустить больного человека, особенно на ранней стадии болезни. Еще одна особенность — трепонемные тесты проявляются позже нетрепонемных, только спустя три-четыре недели после появления твердого шанкра. Поэтому их нельзя использовать в качестве скрининговых. Главное предназначение трепонемных анализов — подтвердить или опровергнуть результаты нетрепонемных тестов.

Еще результаты трепонемных анализов будут оставаться положительными в течение нескольких лет после успешного лечения. Из-за этого их не используют для контроля эффективности лечения, и также не опираются на результаты этих анализов, если они не подтверждены нетрепонемными тестами.

К трепонемным тестам относят:

РПГА (или ее более современная модификация —ТРРА,ТРНА) — реакция пассивной гемагглютинации. Основная трепонемная реакция, применяемая сейчас за рубежом и в России. Простой и удобный тест для определения антител сифилиса в организме.
ИФА (анти-Tr. pallidum IgG/IgM) — иммуноферментный анализ, он же ELISA с английской аббревиатуры. Этот тест возможно проводить и с кардиолипиновым антигеном, так и с трепонемным. Он может использоваться как скрининговый, так и как подтверждающий. По достоверности он не уступает РПГА и так же является рекомендуемым трепонемным тестом для подтверждения диагноза сифилиса.
Иммуноблоттинг — это более дорогой усовершенствованный ИФА -тест. Используется только в сомнительных случаях.
РИФ — реакция иммунофлуоресценции. Технически трудный и недешевый анализ. Является второстепенным, применяется для утверждения диагноза в сомнительных случаях.
РИБТ (РИТ) — реакция обездвиживания (иммобилизации) бледных трепонем. Это реакция сложна, длительна в исполнении и трудна в интерпретации результата. Кое-где еще используется, но постепенно отходит на второй план, уступая место РПГА и ИФА .

Расшифровка серологических анализов на сифилис:

Алгоритм постановки диагноза «сифилис»

Любой диагноз состоит из трех основных столпов медицины: анамнеза (истории болезни), клинических проявлений (симптомов) и лабораторного обследования. Если врач по рассказу пациента и по внешнему осмотру его тела подозревает сифилис, он назначает комплекс анализов (или комплекс серологических реакций — КСР). В него обязательно входят 1 нетрепонемный тест (РМП или RPR) и 1 трепонемный тест (РПГА или ИФА). Если результаты этих тестов расходятся — выполняют дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА или РПГА). Это самая простая схема. В случае сомнительных показателей, в зависимости от ситуации, врач назначает другие методы диагностики.

Экспресс-тест на сифилис, или как определить сифилис в домашних условиях

Тест на сифилис, который можно провести самостоятельно, существует. Его можно свободно купить в аптеке, средняя стоимость — 200-300 руб. Принцип определения болезни аналогичен нетрепонемному RPR . Производители заявляют высокую точность, но в реальности она невысока, не более 70%.

Алгоритм действий при проверке напоминает тест на беременность, только вместо мочи используется кровь. Капля крови наносится на индикатор, и в течение 10-15 минут появляется результат. 1 полоска — тест отрицательный, 2 полоски — тест положительный.
Мы не рекомендуем этот способ диагностики. Если есть сомнения по поводу сифилиса, лучше сразу обратиться к врачу, или хотя бы в независимую лабораторию. Выйдет чуть дороже и дольше, зато намного точнее.

Расшифровка результатов на сифилис: плюсы, кресты и титры.

От результатов тех или иных анализов зависит дальнейшая тактика врача. Результаты скрининговых анализов выражаются либо в крестах (плюсах), либо в отдельной записи:

4 или 3 креста — положительный результат, необходимо дальнейшее обследование на сифилис с помощью других методов диагностики.
2 или 1 крест — сомнительный результат, рекомендуется повторить результат через 10 дней.
0 крестов — отрицательный результат, сифилис не обнаружен.

В случае положительной и сомнительной реакции проводится дополнительное исследование взятой крови: разведение ее с 1:2 до 1:1024 и добавление в каждый титр крови по капле кардиолипинового антигена. В результат записывается максимальный титр, при котором произошла реакция: чем больше разведение, тем больше значение титра, тем выше количество бледных трепонем в крови. Но главная задача определения титра состоит не в том, чтобы вычислить степень зараженности крови, а в том, чтобы проконтролировать успешность лечения: лечение считается эффективным если за 4 месяца титр упадет в 4 раза. К концу лечения результаты нетрепонемных тестов должны стать отрицательными.

Наибольшая чувствительность скрининговых тестов наблюдается во вторичном периоде сифилиса (100%), чуть меньше в первичном (86%) и еще меньшей — в третичном (73%).

Важные нюансы в диагностике сифилиса:

При проведении тестов возможны ложноположительные результаты. Особенно часто они встречаются при скринингах. Если вы никогда не болели сифилисом, а анализы положительные — сразу паниковать не стоит, необходимо сделать еще минимум один альтернативный анализ.
Встречаются и ложноотрицательные результаты. Если имеется подозрение на сифилис, то лучше повторить анализ через несколько недель.
Вылеченный сифилис остается положительным по результатам трепонемных тестов в течение нескольких лет или жизни.

Самые частые вопросы про анализы на сифилис

Как сдать анализ на сифилис бесплатно?

Для этого необходимо обратиться в поликлинику по месту жительства и посетить своего участкового врача, который даст направление на анализ. Исследование на сифилис является бесплатным для всех жителей РФ по полису ОМС .

Где можно сдать анализы на сифилис анонимно?

Анонимно анализы можно сдать в любой платной лаборатории, кожвендиспансеры часто сами предлагают эту услугу. Также, провести тест на сифилис возможно и в домашних условиях с помощью экспресс-тестов, которые продаются в аптеке. Однако необходимо помнить, что такой тест не дает точного результата, и при подозрении на сифилис нужно обратиться к врачу.

Через сколько дней после половой связи можно сдать кровь на сифилис?

Через 1-1,5 месяца. Если произошло заражение, то анализ на сифилис будет положительным не ранее чем через семь-десять дней после появления твердого шанкра, или через 4-5 недель после заражения. Этот период может быть и дольше, так что при отрицательных результатах анализ стоит повторить спустя 2 недели.

Откуда берут кровь на сифилис?

Кровь на сифилис берут чаще из вены, однако могут брать и из пальца. Это зависит от вида анализа.

Подготовка. Как сдавать анализ на сифилис?

Перед сдачей крови на сифилис нельзя есть в течение четырех часов — кровь должна сдаваться на голодный желудок. Кроме того, за 12 часов до анализа нельзя употреблять алкоголь. Это важно, так как повреждение печени алкоголем может спровоцировать ложноположительные анализы.

Сколько в среднем делается анализ на сифилис?

Результаты, как правило, становятся известны на следующий день. Проведение экспресс-тестов занимает по времени не более 30 минут.

Какой анализ берут на сифилис и как он называется?

Для скрининга, когда подозрения на болезнь нет, — либо РМП (реакция микропреципитации), либо RPR (быстрый плазмареагиновый тест). Иногда такие скрининговые тесты называют реакцией Вассермана.

Если есть какие-то реальные подозрения или сомнения — никогда не ограничиваются одним анализом. Одновременно выполняют один любой из скрининговой группы (РМП или RPR) и один любой из более специфичной проверочной группы (РПГА или ИФА), дальше действуют в зависимости от результатов и истории пациента.

Может ли анализ на сифилис быть ошибочным?

Может! Вероятность ошибки разных методов зависит прежде всего от периода болезни и общего состояния организма.

Нетрепонемные тесты чувствительнее всего в разгар болезни — во вторичном периоде. Из-за невысокой специфичности они часто дают ложноположительные результаты. Это может случиться из-за повышения температуры, гриппа или другой инфекционной болезни, недавно проведенной вакцинации, хронических болезней и ряда других причин.

Трепонемные тесты более чувствительны в поздний период. Они могут также давать ложноположительные результаты, но только при наличии в организме похожих на бледную трепонему патогенных бактерий, вызывающих другие заболевания: невенерические трепонематозы пинта (в России редко) или болезнь Лайма (передается через укус клещей).

Ложноотрицательные результаты тестов возможны у всех методов диагностики. Они зависят от иммунного ответа организма: нет ответа — нет реакции на сифилис. Такое возможно у ВИЧ-инфицированных людей, а также иммуно-ослабленных по другим причинам. Кроме того, существует и обратная реакция: гиперпродукция антител, эффект «прозоны», в котором антител так много, что они не дают друг другу осуществить реакцию с антигеном. В результате образуется ложноотрицательный результат.

Могут ли общие анализы показать сифилис?

Сифилис невозможно определить ни по общему анализу крови, ни по биохимическому. Не покажет его и общий анализ мочи или обычный мазок из влагалища. Все исследования на сифилис узкоспециализированы и каждый имеет свое название. По любым другим анализам невозможно вычислить, есть у человека сифилис или нет. Но что покажут другие анализы, если человек болен сифилисом? Разберем каждый из них:

Общий анализ крови: показывает основные клетки крови — эритроциты, лейкоциты, тромбоциты. В конце первичного и в начале вторичного периода у человека могут подниматься лейкоциты, а также увеличиваться СОЭ — показатель воспаления. Это очень неспецифичные показатели, указывающие просто на то, что в организме идет борьба с бактериальной инфекцией. В остальном анализ крови будет соответствовать общему состоянию организма.

Биохимический анализ крови: показывает работу печени, почек, сердца, поджелудочной железы и других органов. Если сифилис еще не поразил эти органы, и они работают исправно — анализ крови будет в норме.

Общий анализ мочи: показывает работу почек и эндокринной системы, а также общее состояние организма. Если острых или хронических заболеваний этих систем нет — анализ будет в норме.

Мазок из влагалища: определяет, есть ли воспалительный или онкологический процесс, а также дисбактериоз. Поставить сифилис по такому мазку нельзя.

Чтобы врачу поставить точный диагноз на сифилис, нужна дополнительная и точная информация, поэтому пациента направляют на обследование, состоящее из нескольких видов анализов .

Одним из самых распространенных способов обнаружения трепонем - это исследование в темном поле микроскопа. Благодаря такому методу, специалист может видеть «живой» микроорганизм в действии. Можно отслеживать и движения бледной трепонемы, а также видеть все особенности её строения. Чтобы начать такой анализ, необходимо добыть материал, который можно взять с поверхности шанкра или очагов эрозии.

Благодаря кср на сифилис, эффективность лечения значительно возрастает, есть возможность ставить прогнозы на дальнейший исход заболевания. С помощью реакции на сифилис устанавливается полная программа терапии и контроль над состоянием больного пациента. Уровень пораженности серологических реакций обозначают крестиком и различаются так:

- отрицательная;
1+ - слабоположительная;
2+ - слабоположительная;
3+ - положительная;
4+ - резко положительная.

Кср на сифилис используется для диагностики всех форм этого венерического заболевания, в обследовании пациентов, имевшие незащищенный секс с инфицированным человеком, людям, подозревающихся на наличие бледных трепонем, а также беременным женщинам - для исключения наличия бледной трепонемы в организме.

В случае положительной Кср реакции на сифилис в результате проведённого анализа, для полной картины врач венеролог назначает ряд дополнительных анализов, и только после получения и рассмотрения результатов, ставит диагноз и определяет эффективную программу лечения. На сегодняшний день, медицина предоставляет возможность провести следующие дополнительные тесты:

РВ (реакция Вассермана). Часто может давать ложноположительный результат.
РИФ (реакция иммунофлюоресценции или метод Кунса). Имеется три метода: прямой, непрямой и с комплементом. Реакция Кунса помогает выявить антигены микробов или обнаружить наличие антител.

Благодаря проведению кср и дополнительных исследований, ошибки в диагностировании быть не должно. А значит, врач венеролог сможет расписать продуктивную программу лечения, прогнозировать течение заболевания и его излечимость. Ведь, чем раньше вы начнёте лечение, тем больше вероятности того, что эта болезнь не принесёт вам непоправимого вреда для всего организма. Сифилис - опасная и заразная болезнь, не лечение которой неминуемо приводит к смерти.

Диагностика сифилиса основывается на клинических и лабораторных данных. Среди последних чрезвычайно ценны серологические исследования, которые проводят не только для подтверждения диагноза сифилиса, но и для наблюдения за его динамикой под влиянием проводимой терапии.

Серология сифилиса сегодня представляет собой отдельную область знаний. Созданы различные реакции, получившие в разных странах государственное признание. Важно, чтобы полученные результаты были правильно истолкованы, чего можно достигнуть лишь при знании основ серологии.

В нашей стране для серологической диагностики сифилиса в соответствии с методическими рекомендациями Министерства здравоохранения применяют:

Микрореакцию преципитации (МР) с кардиолипиновым антигеном - отборочный тест при обследовании населения на сифилис;

Реагиновый плазменный тест (RPR) также, будучи не трепонемным, используется в качестве скринингового теста;

Комплекс серологических реакций (КСР), в который входят реакция связывания комплемента (РСК) с трепонемным и кардиолипиновым антигенами и МР;

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), в которой в качестве антигена используют патогенные бледные трепонемы штамма Никольса;

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) (в модификациях:РИФ-абс, РИФ-ц и РИФ с капиллярной кровью из пальца); в качестве антигена в РИФ используется патогенная бледная трепонема штамма Никольса;

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) с антигеном из культуральных или патогенных бледных трепонем;

Иммуноферментный анализ (ИФА) с антигеном из культуральных или патогенных бледных трепонем.

Все указанные реакции имеют разную чувствительность и специфичность и рекомендованы к применению в зависимости от поставленной задачи.

При массовых профилактических обследованиях населения на сифилис применяют МР с плазмой крови или инактивированной сывороткой крови обследуемых. Результаты реакции оценивают-

ся качественно как 4+, 3+, 2+ и отрицательные. Преимущество экспресс-метода заключается в быстроте получения ответа (через 30-40 мин), небольшом объеме необходимой для анализа крови (2-3 капли), которую можно брать у пациентов из пальца.

С помощью этого экспресс-метода обследуют лиц, подлежащих периодическим медицинским осмотрам на венерические болезни, больных соматических стационаров, лиц, помещенных в спецприемники. Если экспресс-метод применяется изолированно, то является лишь отборочным тестом. На основании его положительного результата диагноз сифилиса не ставят, а обследуемых направляют к дерматовенерологу для дальнейшего клинического обследования и исследования их крови с помощью любого из других диагностических тестов (КСР, РИБТ, РПГА, ИФА или РИФ). Экспресс-метод не применяют у беременных, доноров в связи с тем, что он часто дает ложноположительные результаты. Средние медицинские работники, прошедшие специальную подготовку, производят взятие крови из пальца и постановку МР. Учитывать ее результаты обязаны врачи-лаборанты.

РСК с трепонемным и кардиолипиновым антигенами применяются для подтверждения диагноза сифилиса при наличии активных проявлений болезни, для обследования лиц, бывших в половом контакте с больным сифилисом, выявления латентного (скрытого) сифилиса, эффективности проводимой терапии, при обследовании больных психиатрических и неврологических стационаров, доноров и беременных, включая лиц, направляемых на искусственное прерывание беременности.

Кровь для исследования берут в количестве 5-7 мл из локтевой вены стерильной иглой при соблюдении правил асептики. У грудных детей кровь можно получить из височной вены или из надрезов на пятке. Кровь берут строго натощак (спустя 5-6 ч после приема пищи) и оставляют ее в чистых сухих пробирках на 2-3 ч при комнатной температуре для свертывания. Постановку КСР и специфических реакций производят в серологических лабораториях кожно-венерологических учреждений, а в сельской местности - в лабораториях сельских районных больниц.

Для пересылки крови для исследования в отдаленные лаборатории очень удобен метод сухой капли. Для этого на следующий день после забора крови сыворотку отделяют от сгустка. Градуированной пипеткой набирают 1 мл сыворотки и выливают ее в виде двух отдельных кружков на полоску плотной бумаги (вощаной или целлофана) размером приблизительно 6x8 см. На свободном крае бумаги надписывают фамилию, имя и отчество больного, дату забора крови и порядковый номер. Сыворотку на бумаге, защищенную от прямых лучей солнца и пыли, оставляют

на 24 ч при комнатной температуре для засыхания. После этого полоски бумаги с высушенной сывороткой свертывают и отсылают в лабораторию.

РСК в КСР с кардиолипиновым антигеном не очень чувствительна и становится положительной через 2-4 нед после возникновения твердого шанкра, причем титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимума (1:160-1:320 и выше) при вторичном свежем сифилисе. Затем титр реагинов постепенно падает и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:20. У больных с третичным сифилисом указанные реакции дают положительный результат только в 70% случаев.

Следует подчеркнуть, что КСР не является строго специфичным для сифилиса и в ряде случаев может давать ложноположительные (неспецифические) результаты. Такие ложноположительные реакции наблюдаются у больных лепрой, малярией, иногда с аутоиммунным заболеванием, новообразованиями, пневмонией, туберкулезом, заболеваниями печени, при приеме лекарственных препаратов (сульфаниламиды, глюкозиды, валериана и др.), а также во время беременности, при менструациях и т.д. При взятии крови для исследования на КСР необходимо предупреждать обследуемого, чтобы он за 2-3 дня до этого не употреблял алкоголь, жирную пищу, не принимал лекарственные препараты. Не рекомендуется исследовать кровь в течение 1-й недели после вакцинации, травм, хирургических вмешательств, при лихорадочных состояниях, в течение первых 2 нед после родов, у новорожденных в первые 10 дней жизни, поскольку физико-химические изменения в сыворотке крови при этих состояниях могут быть сходны с теми, которые наблюдаются у больных сифилисом.

Ложноположительные результаты могут получаться также в связи с техническими ошибками (неполный гемолиз, нестерильное взятие крови, недостаточная квалификация лаборантов).

Для отдифференцирования ложноположительных результатов КСР от истинных, для диагностики скрытых и поздних форм сифилиса, при подозрении на сифилитическую инфекцию, для установления ретроспективного диагноза заболевания рекомендуется применять специфические серологические реакции (РИБТ, РПГА, ИФА или РИФ)

Для проведения специфических серологических реакций кровь в количестве 5-10 мл берут также из локтевой вены натощак. Кровь вливают в сухую пробирку для исследования на РИФ и в стерильную пробирку для исследования на РИБТ. Постановка специфических серологических реакций на сифилис производится в специализированных лабораториях кожно-венерологических учреждений.

РИФ основана на непрямом методе определения флюоресцирующих антител. Антигеном в этой реакции служит взвесь убитых культуральных бледных трепонем, фиксированная к предметным стеклам, на которые наносят исследуемую и антивидовую флюоресцирующую сыворотки. Результаты РИФ определяют под люминесцентным микроскопом путем оценки свечения трепонем в препарате. При положительном результате трепонемы имеют желтовато-зеленое свечение, степень которого обозначают плюсами от 1 до 4; при отрицательных результатах трепонемы не светятся.

Другая специфическая реакция на сифилис - РИБТ - основана на феномене обездвиживания бледных трепонем антигенами сыворотки крови больного в присутствии комплемента. В качестве антигена для РИБТ используют взвесь живых бледных трепонем, полученных от зараженных сифилисом кроликов. Подсчет утративших подвижность (иммобилизированных) трепонем ведут под микроскопом. Результаты реакции оценивают в процентах: от 0 до 20% - отрицательная, от 21 до 30% - сомнительная, от 31 до 50% - слабоположительная, от 51 до 100% - положительная. РИБТ становится положительной в конце первичного периода сифилиса и остается таковой в течение всех периодов этого заболевания, а иногда и после полноценного противосифилитического лечения. При третичном сифилисе, специфических поражениях внутренних органов, нервной системы, при врожденном сифилисе, когда КСР часто отрицателен, РИБТ дает положительные результаты в 98-100% случаев. Диагноз скрытого сифилиса обязательно следует подтвердить положительной РИБТ.

РИБТ также может давать ложноположительные результаты, если в исследуемой сыворотке содержатся трепонемоцидные вещества (антибиотики - пенициллин, тетрациклин), вызывающие неспецифическую (токсическую) иммобилизацию бледных трепонем. Поэтому нельзя исследовать кровь на эту реакцию раньше, чем через 2 нед после окончания приема антибиотиков.

Серологические исследования можно использовать и для определения поражения сифилисом нервной системы, исследуя цереброспинальную (спинно-мозговую) жидкость больного. Ее исследуют также на наличие белка, ферментных элементов, которые свидетельствуют о патологии и помогают диагностировать ту или иную форму нейросифилиса. Цереброспинальную жидкость получают при люмбальной пункции. Проведенная асептически, она не представляет никакой опасности и может быть осуществлена врачом даже в амбулаторных условиях. Серологические исследования цереброспинальной жидкости показаны во всех случаях сифилиса

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — . При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после , через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления . Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, . Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с , в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации (МРП)

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

ПЦР на сифилис

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Серологическая диагностика сифилиса

Диагностика сифилиса основывается на клинических и лабораторных данных. Диагноз сифилиса ставят только после лабораторного подтверждения, т. е. обнаружения бледных трепонем в отделяемом твердого шанкра, эрозивных папул при первичном и вторичном сифилисе, и данных серологического обследования. Серологические реакции являются чрезвычайно ценным методом не только для подтверждения диагноза сифилиса, но и наблюдения за динамикой его течения под влиянием лечения и определения излеченности болезни.

Стандартные компоненты комплекса серологических реакций (КСР) для констатации сифилитической инфекции в настоящее время дополняются трепонемными реакциями: РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем), РИФ (реакция иммунофлюоресценции). Реакция Вассермана (RW, РВ) основана на феномене связывания комплемента. Для ее постановки используют кардиолипиновый антиген, являющийся холестеринизированным спиртовым экстрактом из мышц бычьего сердца и обладающий сходными антигенными свойствами с бледной трепонемой.

Реакция Вассермана. Комплемент связывается комплексом (липоидный антиген и реагин испытуемой сыворотки). Для индикации образовавшегося комплекса используют гемолитическую систему (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка).

В группу КСР кроме реакции связывания комплемента с кардиолипиновым и трепонемным антигенами, включена реакция на стекле (экспресс-метод). Выраженность гемолиза при РВ обозначается плюсами:

резко положительная - 4 +; положительная - 3 +; слабоположительная - 2 + или 1 +; отрицательная - -.

Имеет значение и постановка реакции по количественному методу, т. е. с различными разведениями сыворотки (1:10; 1:20 и т.д. до 1:320). Многочисленность стандартных серологических реакций объясняется антигенной мозаичностью бледных трепонем, в связи с чем в сыворотке крови больных возникает соответствующая множественность антител (комплементсвязывающие, агглютинины, преципитины, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию и др.). В каждой стадии сифилиса могут преобладать те или иные антитела и, следовательно, реакции с одними антигенами могут быть уже положительными, а с другими - еще отрицательными. Кроме того, относительная специфичность стандартных серологических реакций вызывает необходимость во избежание диагностических ошибок пользоваться не одной из них, а комплексом реакций. КСР становятся положительными в конце 3-й или в течение 4-й недели после появления твердого шанкра. Эти реакции бывают резко положительными и в значительном разведении сывороток практически у всех больных вторичным свежим (98-99%), вторичным рецидивным (100%), третичным активным (70-80%) и третичным скрытым (50-60%) сифилисом. Однако КСР не является строго специфичным комплексом реакций для сифилиса. Они могут оказаться положительными у больных лепрой, туберкулезом, бруцеллезом, малярией, красной волчанкой, а также при пневмонии, заболеваниях печени, онкологических болезнях, после приема алкоголя, жирной пищи, во время беременности, особенно во второй ее половине, а также в течение первых 2 нед. после родов. С возрастом количество неспецифических ложноположительных результатов КСР увеличивается.

Для обоснованного диагноза сифилиса наряду с данными КСР учитываются клинические данные, результаты исследования на бледную трепонему в манифестных проявлениях первичного и вторичного сифилиса, данные других серологических реакций - РИБТ и РИФ.

РИБТ основана на феномене обездвиживания бледных трепонем антителами типа иммобилизинов, имеющимися в сыворотке крови больных сифилисом. В качестве антигена для РИБТ используют взвесь бледных трепонем, полученных из тканей сифилитического орхита кролика. Бледные трепонемы после добавления к ним сыворотки крови больного прекращают движение, т. е. происходит их иммобилизация. Результаты реакции оценивают в процентах: положительная РИБТ констатируется при иммобилизации от 51 до 100% бледных трепонем, слабоположительная - от 31 до 50%, сомнительная - от 21 до 30% и отрицательная - от 0 до 20%. Реакцию ставят в условиях анаэробиоза. Иммобилизины появляются в сыворотке крови больных позднее, чем другие антитела, поэтому РИБТ становится положительной позже, чем КСР и РИФ. РИБТ является наиболее специфичной из существующих реакций на сифилис. Ее основное назначение - распознавание ложноположительных результатов при постановке КСР. Это особенно важно в отношении больных, у которых сифилис протекает скрыто без наружных проявлений, но с поражением внутренних органов или нервной системы. Особенное значение имеет РИБТ при распознавании ложноположительных результатов КСР у беременных. Следует помнить, что неспецифические положительные результаты РИБТ возможны и у больных саркоидозом, красной волчанкой, туберкулезом, циррозом печени и др. Однако при этих заболеваниях РИБТ бывает слабоположительной (от 30 до 50%) и никогда не достигает 100%). При лечении антибиотиками результаты РИБТ становятся негативными. Поэтому исследования с помощью РИБТ проводятся только через 7 дней, если вводились водорастворимые антибиотики, и через 25 дней после окончания лечения дюрантными антибиотиками.

РИФ - более чувствительная реакция, поэтому она бывает положительной уже в первичном серонегативном периоде сифилиса у 80% больных. По степени специфичности РИФ уступает РИБТ, что не позволяет заменить ею РИБТ, хотя техника ее значительно проще. Реакцию ставят в нескольких модификациях: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-абс. (абсорбированная). РИФ-10 более чувствительна, а РИФ-200 и РИФ-абс. более специфичны. Принцип реакции заключается в том, что специфический антиген (бледные трепонемы) соединяют с сывороткой крови больного (антитела) и антивидовой флюоресцирующей сывороткой (кроличья сыворотка против глобулинов человека, соединенная с флюоресцеином, - веществом, светящимся при ультрафиолетовом свете). При положительной реакции в люминесцентном микроскопе можно видеть желто-зеленое свечение бледных трепонем, поскольку они оказываются окруженными прилепляющимися к ним флюоресцирующими антителами. Степень свечения оценивается плюсами, как и при КСР. Положительная реакция констатируется 4 +, 3 + и 2. +. При степени свечения 1 + и отсутствии свечения реакция считается отрицательной. При вторичном сифилисе РИФ положительна почти в 100% случае. Она всегда положительна при латентном сифилисе (99-100%), а при третичных формах и врожденном сифилисе положительна в 95-100%.

Экспресс-метод (микрореакция на стекле). В этой реакции, так же как и при КСР, используют кардиолипиновый антиген, одну каплю которого смешивают с 2-3 каплями сыворотки крови обследуемого человека в лунках специальной стеклянной пластины. Реакция протекает по механизму преципитации. Общая продолжительность постановки реакции 10-40 мин. Результат оценивают по количеству выпавшего осадка и величине хлопьев; выраженность реакции обозначают плюсами: 4 +, 3 + и т.д., как и КСР. Микрореакция на стекле менее специфична лля больных сифилисом, чем РВ, но несколько превосходит ее по чувствительности. Ложноположительные результаты при экспресс-методе получают чаще, чем при РВ. Поэтому этот метод разрешен для применения только как отборочная реакция при массовых обследованиях населения, диспансеризации и обследовании больных в клинико-диагностических лабораториях соматических больниц. Окончательный диагноз сифилиса на основании этого метода устанавливать запрещено. Только экспресс-метод нельзя применять при обследовании доноров, беременных, а также для контроля после лечения больных сифилисом.

Для диагностики сифилиса можно использовать и другие методы: иммуноферментный анализ (ИФА) с реакцией микропреципитации (РПМ) или реакцией пассивной гемагглютинации (РПГА) с РМП (в том числе зарубежных аналогов РМП - RPR или VDRL).

При проведении клинико-серологического контроля после специфического лечения (для определения эффективности терапии) допускается количественное исследование РМП (изучение титра реакции в динамике).

Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa). Принцип реакции заключается в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя, с антигеном испытуемой сыворотки крови и выявления специфического комплекса антиген-антитело с помощью антивидовой иммунной сыворотки, меченной ферментом. Чувствительность и специфичность ИФА аналогичны РИФ.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Макромодификацию этой реакции именуют ТРНА, микромодификацию - МНА-ТР, автоматизированный вариант - АМНА-ТР.

IgM-серология. В последние десятилетия широко изучается динамика образования антител в организме больных сифилисом до, в процессе и после окончания лечения. Это вызвано тем, что у пациентов, полноценно леченных по поводу сифилиса, в течение длительного времени остаются положительные результаты специфических серологических реакций на сифилис, что усложняет решение вопроса об излеченно-сти больных, а также постановку диагноза раннего врожденного сифилиса. Затруднена также дифференциальная диагностика рецидива заболевания и реинфекции. При изучении антителообразовния в организме больных сифилисом было установлено, что первыми после заражения вырабатываются специфические IgM, выявляемые уже на второй неделе после заражения и достигающие максимальной концентрации в крови на 6-9 неделе. Через 6 мес. после окончания терапии у большинства больных в крови они не определяются. На четвертой неделе после инфицирования организм начинает продуцировать специфические IgG. Этот вид иммуноглобулинов в наибольшем количестве определяется через 1-2 года после заражения. Следует обратить внимание на то, что специфические IgM перестают вырабатываться при исчезновении из организма антигена, а секреции IgG продолжается клонами клеток памяти. Кроме того крупные молекулы IgM не проходят через плаценту от матери к плоду, в связи с чем по их наличию у ребенка судят об его инфицировании бледной трепонемой. Ввиду того, что концентрация в крови специфических IgM закономерно снижается с течением времени, рост титра этих антител может служить вспомогательным признаком наличия рецидива заболевания или реинфекции.