Анализа́тор гематологи́ческий - прибор (комплекс оборудования), предназначенный для проведения количественных исследований клеток крови в клинико-диагностических лабораториях. Может быть автоматическим или полуавтоматическим. Полуавтоматический гематологический анализатор от автоматического отличается тем, что процесс разведения пробы крови осуществляется отдельным прибором - дилютером. После приготовления разведения цельной крови оператор должен перенести разведенную пробу в модуль измерения. В настоящее время полуавтоматические анализаторы практически не выпускаются.
Поэтому чрезвычайно важно проводить регулярный мониторинг пациентов, чтобы лучше реагировать на эпизоды фебрильной нейтропении на основе этих знаний. Полученные данные соответствуют зарубежным публикациям. 
Клиническая картина бактериальных инфекций в гематоэнкологии.
Клиническая картина может и не может быть изменена основным диагнозом и его терапией. Усложнение - кровотечение диатеза из-за тромбоцитопении и частых нарушений свертывания гематологических пациентов. Часто бывает трудно отличить бактериальную инфекцию от гематологической злокачественности или ответ на химиотерапию или другое лечение, или от вирусных или грибковых инфекций.
Автоматический гематологический анализатор представляет собой полностью автоматизированный прибор, в котором весь аналитический процесс выполняется автоматически.
Современные автоматические анализаторы способны обрабатывать десятки образцов (от 60 до 120) в час, с соответствующей спецификации точностью и воспроизводимостью, а также хранить результаты тестов во встроенной памяти и, при необходимости, распечатывать их на встроенном термопринтере или внешнем принтере.
В некоторых случаях ни лаборатория, ни визуализация не могут помочь. Особенно у пациентов, у которых противораковая терапия содержит высокие дозы кортикостероидов, мы видим серьезные инфекции с высоким увеличением воспалительных параметров, но без лихорадки. В дополнение к лабораторным признакам воспаления требуется высокая вероятность подозрения с такими симптомами, как изменение психического статуса или психомоторный инсульт, диспепсия, тахикардия или снижение артериального давления. В наиболее рискованные периоды лечения мелкие изменения в общем состоянии могут быть признаком сепсиса и показаниями агрессивной антимикробной терапии.
Современные гематологические анализаторы классифицируются по номенклатуре определяемых показателей клеток крови.
Восьми-параметровые гематологические анализаторы определяют следующие параметры: концентрации эритроцитов (RBC), лейкоцитов (WBC), тромбоцитов (Plt), гемоглобина (Hb), а также следующие параметры эритроцитов: средний объем эритроцитов (MCV), среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (MCH), среднюю концентрацию гемоглобина в эритроцитах (MCHC), гематокрит (Hct).
Тяжелый сепсис и септический шок чаще встречаются у гематологических пациентов, чем у населения в целом, но клиническая картина принципиально не отличается. Для развития тяжелого сепсиса с гипотонией в каждом случае всегда следует учитывать лихорадочную нейтропению. На практике это может быть типичный случай глубокой гипотонии с драматическим начиная озноб, тахикардия, нарушение сознания или более медленный процесс длится несколько часов до дней, когда пациент с лихорадочной давлением нейтропения капли к пограничным значения и развивается олигурия и лабораторные признаки гипоперфузии тканей.
Восьми параметровые гематологические анализаторы в настоящее время практически не производятся.
Гематологические анализаторы класса 3-диф . Гематологические анализаторы класса 3-диф, в зависимости от выпускаемой модели, позволяют определять от 16 до 22 показателей клеток крови. Анализаторы этого класса, помимо тех параметров, которые определяют восьми-параметровые анализаторы определяют три субпопуляции лейкоцитов: концентрации лимфоцитов (Lm), гранулоцитов (Gr) и, так называемых средних лейкоцитов (Mid), а также их процентное содержание Lm%, Gr% и Mid%. Отсюда и название класса 3-диф. Кроме этого гематологические анализаторы этого класса определяют коэффициент вариации объема эритроцитов (RDW) и ряд показателей, характеризующих тромбоциты: средний объем тромбоцитов (MPV), долю объема тромбоцитов(Tct) (аналог гематокрита), коэффициент вариации объема тромбоцитов (PDW).
Тяжелый сепсис может привести только к снижению значений артериального давления для ограничения значений и психологических изменений. Это условия, требующие немедленной эмпирической агрессивной антимикробной и комплексной интенсивной терапии. Фебрильная нейтропения смутного происхождения.
Это наиболее частая первоначальная презентация бактериальной инфекции при нейтропении. Базовая диагностика и применение эмпирической антимикробной терапии являются актуальными, и в ближайшие часы и дни можно ожидать симптомов локализации или микробиологических данных о гемокультурах. другие биологические материалы. Общим клиническим случаем является сохранение температуры, несмотря на адекватную антимикробную терапию или рецидив после по крайней мере двухдневного афебрильного статуса - рецидивирующего лихорадочного.
Важной диагностической информацией, которую позволяет получить гематологические анализаторы этого класса, являются функции распределения по объему эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов - гистограммы.
Энциклопедичный YouTube
1 / 2
Использование гематологического анализатора
Почему лаборант делает анализ крови лучше, чем гематологический анализатор? - Доктор Комаровский
Фебрильная стойкость в течение более 72 часов не создает более высоких рисков для пациента, если клиническое состояние пациента хорошее и стабильное. Пациенты с устойчивой температурой через 72 часа улучшают 60% клиническое состояние, 20% стабильны и 20% ухудшаются. Как правило, только у этих пациентов в ухудшающемся клиническом состоянии требуется лечение антибактериальной терапии после 72 часов температуры. Могут быть много причин, но часто это медленный эффект от других хорошо продуманных противомикробных препаратов.
В случае повторяющейся температуры всегда следует учитывать микотическую этиологию или инфекцию устойчивыми микроорганизмами. Рецидивирующая лихорадка несет более высокую заболеваемость и смертность. Эти схемы принятия решений не могут быть встроены в простые алгоритмы обращения. Клиническая чувствительность и ежедневное обследование пациентов являются релевантными переменными в процессе принятия решений. Соответствие врачам рекомендаций по антибиотикам значительно отличается в рабочем времени и дежурстве.
Субтитры
Реагенты для гематологических анализаторов
Каждый гематологический анализатор, как правило, рассчитан на свою собственную реагентную систему, однако между ними есть много общего.
Основными составляющими комплектов реагентов для гематологических анализаторов являются: изотонический разбавитель (дельюэнт), лизирующий раствор (гемолитик), промывающий раствор и очищающий раствор.
Клинически документированные инфекции. Бактериальное воспаление легких является общей первичной нейтропенической инфекцией. Обычно происходит консолидация с отрицательной бронхограммой, и возникает непрозрачность измельченного стекла. Поэтому результаты легочного инфильтрата должны приводить либо к инвазивному бронхоальвеолярному лаважу, либо к превентивной антимикотической терапии у пациентов с высоким риском.
Нейтропенический энтероколит является клинически определенной единицей. Как правило, глубокая нейтропения приводит к воспалению слизистой оболочки кишечника. Состояние связано с бактериальной инвазией слизистой оболочки кишечника и бактерий. Симптомы варьируются от легкой спазмы живота и диспепсии до сильной боли поднятого паралитического живота, требующего подавления опиоидов. Состояние может занять много дней, и улучшения после ремонта гранулеза часто возникают. Однако основным отличием является дифференциальная диагностика.
В зависимости от конкретной конструкции анализатора в базовый комплект может входить лишь часть указанных реагентов.
Изотонический разбавитель
Изотонический разбавитель - это буферный раствор с фиксированными параметрами рН , электропроводности и осмолярности . Слово изотонический указывает только на одно и не самое важное свойство реагента - поддержание требуемого осмотического давления с целью обеспечения постоянства объема клеток крови. Дело в том, что эритроциты принимают тот объем, который им диктует осмолярность раствора. При увеличении осмолярности, в течение 3:5 сек эритроциты сжимаются до некоторого равновесного объема. Если осмолярность раствора уменьшается, объем эритроцитов, соответственно, увеличивается. Таким образом, средний объем эритроцитов (MCV) увязывается с осмолярностью изотонического разбавителя. Стабилизирующие добавки в изотоническом разбавителе должны обеспечивать сохранность форменных элементов крови в течение достаточно длительного времени в первом разведении крови. Присутствие в растворе антикоагулянта должно эффективно предотвращать образование фибриновых сгустков и агрегацию тромбоцитов. В случае гематологических анализаторов, проводящих дифференциацию лейкоцитов на три популяции, изотонический разбавитель содержит специальные добавки, модифицирующие мембраны лейкоцитов. В этом случае изотонический разбавитель должен применяться в согласованной паре с соответствующим лизирующим раствором. Следует иметь в виду, что для всех гематологических анализаторов с дифференциацией лейкоцитов на три популяции штатным режимом является работа с цельной кровью. В варианте работы с предилюцией время стояния пробы крови в первом разведении по инструкциям фирм изготовителей не должна превышать 30...60 мин., что трудно осуществимо в практике российских лабораторий, преимущественно использующих именно режим предилюции. Исходя из требований практики отечественных лабораторий, специально разработан уникальный изотонический разбавитель, в котором дифференциация лейкоцитов сохраняется вплоть до 3 ч стояния проб крови в первом разведении.
Катетерные инфекции являются частым осложнением длительной нейтропении. Это происходит как воспаление мягких тканей на месте введения катетера или как связанная с катетером инфекция кровотока. Эти два проявления могут возникать или не возникать одновременно. Состояние может иногда осложняться зараженным или неинфицированным тромбозом с типичными клиническими симптомами венозного закрытия или видимым только при допплеровском ультразвуковом исследовании.
Связанные с катетером сосудистые инфекции имеют клинические проявления, неотличимые от других бактериемий. Чтобы отличить ли источник бактериемии центрального венозного катетера или других подшипников может быть использован в паре, собранные культурах крови из периферической крови центрального венозного катетера и оценивать разницу во время к положительности в автоматизированном анализаторе или количественно исследовать культуру крови. Поэтому необходимо учитывать происхождение центрального венозного катетера при захвате положительных гемокультур для симптомов бактериемии, наличия центрального венозного катетера и отсутствия другого прозрачного инфекционного осадка.
Лизирующий раствор
Другим важнейшим реагентом является лизирующий раствор (гемолитик), который при добавлении в разведение крови приводит к лизису эритроцитов и в то же время сохраняет лейкоциты . Необходимо, чтобы гемолиз эритроцитов был качественный, поскольку в гемолизате подсчитываются лейкоциты, которых первоначально примерно в 1000 раз меньше, чем эритроцитов. Для обеспечения этих свойств лизирующий раствор, как правило, содержит сложную композицию ионных поверхностно-активных соединений.
У пациентов с нейтропенией катетер затем всегда извлекается для выявления признаков сильного сепсиса, местных признаков и конкретных агентов. Инфекции мягких тканей. В нейтропении инфекции часто осложняются и иногда распространяются очень быстро. Пациенты не имеют возможности создавать абсцессы, но флегмонозное воспаление может иметь значительную величину. Частые локализации - это область перианала, подмышечной области, паха, окружающих инвазивных входов, лица. Это может быть также вторичная зараженная экзантема или прогрессирование эмпирации гематогенной септической кожи.
В анализаторах с дифференциацией лейкоцитов на три популяции лейкоциты под действием лизирующего раствора изменяют свои размеры так, что выделяются фракции лимфоцитов (первый пик лейкоцитарной гистограммы, 35...90 куб. мкм), гранулоциты (крайний правый пик лейкоцитарной гистограммы, 120...400 куб. мкм). В средней части гистограммы (90...120 куб. мкм) в области так называемых "средних" клеток расположены моноциты , базофилы и эозинофилы . Таким образом гематологический анализатор по анализу размера клеток может определять процентную и абсолютную концентрацию лимфоцитов, гранулоцитов и "средних" клеток (суммарно моноциты, базофилы и эозинофилы). Наряду с факторами пробоподготовки свойства реагентной системы оказывают существенное влияние на качество дифференциации лейкоцитов.
Наиболее распространенная этиология - стафилококковая, также необходимо думать о смешанной этиологии с грамположительными и грамотрицательными бактериями и искать даже после события. наличие газа, которое может свидетельствовать о клостридиальной этиологии и является очень серьезным. Из-за панцитопении и невозможности ограничить воспаление, хирургическое вмешательство на ранних стадиях невозможно, но может использоваться вместе с антибактериальной терапией, особенно после восстановления гранулопоэза.
Микробиологически документированные инфекции. Клинические, визуализационные и лабораторные исследования. Существенным является обнаружение субъективных трудностей, включая вопросы о боли, кашле, качестве стула, зрительных проблемах, путанице, балансе, боли вокруг инвазивных материалов, ощущении напряжения и отечности. Кроме того, необходимо тщательное физическое обследование: не забывайте о коже и слизистых оболочках, перианальных областях, контроле над инвазивными местами входа, симптомах кровотечения, давлении, пульсе, периферическом кровотоке, оценке сознания, менингеальных симптомах.
Промывающие растворы
Промывающие растворы непосредственно не участвуют в процессе измерения, однако их свойства существенно влияют на стабильность аналитических характеристик анализаторов. Характерной особенностью гематологических анализаторов, использующих принцип Культера , является наличие счетных апертур малого диаметра. А, как известно, кровь содержит в себе ряд веществ, которые имеют тенденцию осаждаться на апертуре и внутренней поверхности гидравлической системы. Это постепенно приводит к засорам и ошибочным результатам. В некоторых случаях прибор просто останавливается и требует капитальной чистки. То есть качество промывающих растворов влияет на долговременную стабильность работы прибора.
Первоначальное обследование для лихорадочного нейтропенического пациента включает рентгенографию грудной клетки. 
Диагностика - микробиологические исследования. Идентификация причины инфекции и изучение ее восприимчивости к антибиотикам является необходимым условием для целенаправленной антибактериальной терапии. Непрерывные усилия, направленные на получение наиболее целенаправленного лечения за счет эмпиризма, являются основной целью антибиотикотерапии. Микробиологические данные об инфекционном агенте предполагают правильный сбор клинически значимого образца биологического материала, который поступает непосредственно с сайта инфекционного процесса, в идеале до антибактериальной терапии, если состояние пациента по крайней мере минимально.
Промывающие растворы бывают, в основном, трех типов. Первый тип - растворы для мягкой промывки магистралей анализатора между пробами, и они не несут в себе особых моющих свойств. Такие растворы имеют в своем составе поверхностно - активные вещества (детергенты). К сожалению, детергентные промывающие растворы практически не отмывают белки. Поэтому для очистки от белковых осадков применяют растворы на основе гипохлорита натрия - второй тип промывающих растворов. Эти растворы являются очень сильными депротеинезаторами. Однако, раствор гипохлорита натрия - это очень едкое вещество, и долгого контакта с ним не выдерживают детали из пластика (они трескаются), металла (они подвергаются коррозии). Поэтому злоупотреблять такими растворами нельзя. Данные растворы в основном применяются в экстренных случаях, когда необходимо быстро очистить счетную апертуру, а также для сервисных работ.
Соблюдение выборки и требуемое микробиологическое исследование для диагностики инфекции определяют ее клиническую достоверность. Если образец не является клинически достоверным, тест может вводить в заблуждение. Пробоотбор образцов и транспортировка должны проводиться в определенных условиях; соблюдение этих условий обеспечивает так называемую техническую обоснованность выборки. У гематологических пациентов инфекционные осложнения часто вызывают патогенные микроорганизмы; существует потребность в тесном сотрудничестве между лечащим врачом и клиническим микробиологом, чтобы интерпретировать это открытие в контексте общего заболевания.
Современное решение проблемы качественной промывки прибора - применение ферментативных промывающих растворов. Благодаря наличию ферментов, такие растворы эффективно удаляют адсорбированные на стенках гидравлической системы белки и другие вещества. При этом они совершенно нейтральны и не оказывают вредного действия на детали прибора. Трудность создания таких промывающих растворов заключается в известном свойстве ферментов быстро терять активность. Вследствие этого, в мире имеется сравнительно немного фирм производителей ферментативных промывающих растворов.
Свидетельством возбудителя в крови пациента, в случае системной инфекции, является одно из наиболее важных исследований. Несколько образцов крови асептически удаляются от пациента. Их культивация происходит в специальных флаконах культуральной среды, которые вводятся в автоматизированный анализатор с системой обнаружения, позволяющей сигнализировать о положительном обнаружении в порядке времени. Тест проходит 5-7 дней, когда образец может быть объявлен отрицательным.
Имплантация инородного материала значительно увеличивает риск заражения. Микроорганизмы производят биопленку на поверхности имплантатов, которая защищает их от воздействия компонентов иммунной системы, а также антибиотиков. В случае признаков заражения катетером или лихорадочных условий, необъяснимых по-другому, все инвазии следует заменить, если это разрешает состояние пациента. Кончики катетера отправляются в лабораторию в стерильном сухом контейнере как можно скорее после удаления, чтобы сделать полуколичественное исследование в соответствии с Маки.
В настоящее время для подсчета и анализа клеток крови используют гематологические анализаторы разного уровня сложности.
Преимущество современных технологий подсчета и оценки форменных элементов крови:
высокая производительность (до 100-120 проб в час),
небольшой объем крови для анализа (12-150 мкл)
анализ большого массива (десятки тысяч) клеток
определение с высокой точностью и воспроизводимостью 20 и более параметров одновременно
графическое представление результатов исследований (гистограммы, скетограммы).
По сравнению с визуальной техникой автоматический подсчет более точный метод оценки концентрации клеток. Автоматизированный анализ крови открыл много новых диагностических возможностей, но одновременно он располагает и некоторыми ограничениями, особенно касающихся морфологических исследований клеток. Несмотря на все достоинства, даже самые современные анализаторы не в состоянии полностью заменить метод микроскопической оценки клеток.
Подготовка и проведение исследований на гематологических анализаторах
При выполнении анализа на гематологическом анализаторе предпочтительно использовать венозную кровь. Взятие венозной крови лучше осуществлять, применяя специальные одноразовые системы с ЭДТА - «МОНОВЕТ». Это гарантирует отсутствие в образце посторонних примесей, а наличие антикоагулянта в оптимальной концентрации предотвращает образование фибриновых сгустков и агрегацию тромбоцитов.
При взятии капиллярной крови оптимально использовать пробирки с ЭДТА - «МИКРОВЕТ». Нанесенный на внутреннюю поверхность пробирки мелкодисперсный порошок ЭДТА быстро растворяется в крови и надежно блокирует процессы свертывания крови и активации тромбоцитов.
Не следует использовать пробирки с выпаренным раствором ЭДТА.
При испарении раствора на дне пробирки образуются крупные кристаллы ЭДТА, которые очень медленно
растворяются в крови. Это может приводить к образованию фибриновых нитей в верхней части пробы крови.
Не сдавливать палец пациента
при взятии капиллярной крови и не накладывать жгут,
либо ослаблять его сразу же после прокола вены при взятии венозной крови.
Не забирать кровь со стекла.
Цельная кровь имеет высокую вязкость и поэтому трудно перемешивается. Перед началом измерения цельную кровь следует перемешивать плавным переворачиванием и вращением пробирки в течение не менее 2 минут. Для этих целей лучше всего использовать специальный гематологический шейкер.
При ручном перемешивании цельной крови недопустимы резкие встряхивающие движения, так как они приводят к механическому лизису эритроцитов.
Для дезинфекции подушечки пальца перед взятием крови и высушивания носика пробирки следует использовать специальные безворсовые салфетки. Помните, что применение ватных тампонов и других волокнистых материалов подобного рода приводит к засорению волокнами датчика подсчета клеток и гемоглобиновой камеры (для этого достаточно даже одного волокна!). В результате точность и воспроизводимость измерения концентрации гемоглобина резко падает. Извлечение посторонних частиц из камеры требует повышенного расхода промывающего раствора, а в ряде случаев, даже частичной разборки прибора.
При работе в режиме предилюции следует учитывать, что образование пузырьков при разведении крови с использованием дилютора может приводить к лизису клеток крови и, как следствие, являться причиной завышения результатов подсчета тромбоцитов. Поэтому необходимо следить, чтобы жидкость стекала по стенке стаканчика без образования пузырьков.
Во избежание случаев несовместимости реагентов следует использовать изотонический раствор и гемолитик от одного изготовителя. При смене реагентов одного производителя на реагенты другого производителя обязательно консультируйтесь с инженерно-сервисной службой, так как может понадобиться перекалибровка прибора.
При эксплуатации гематологических анализаторов важную роль играет качество электрической сети и заземления. Внезапное отключение электропитания часто приводит к сбоям в работе приборов и необходимости вмешательства инженеров сервисной службы. В том случае, если электрическое питание пропадает в момент забора пробы или анализа, и появляется спустя несколько часов (5 - 20), последствия могут оказаться просто плачевными - может выйти из строя гидравлика, засориться сгустками крови капиллярные трубки, апертура и т.д. Поэтому прибор должен работать с источником бесперебойного питания.
Периодически необходима калибровка по стандартным материалам, так как электронные и механические компоненты прибора, датчиков, насосов и т.д. со временем подвергаются старению и меняют свои технические параметры. Для осуществления калибровки, необходимо пользоваться только качественными контрольными материалами!
Проточные гематологические анализаторы
На основании количества определяемых параметров и степени сложности их можно условно разделить на 3 основных класса:
I класс - полуавтоматические и автоматические счетчики клеток крови, позволяющие определять до 8-10 параметров, включая WBC, RBC, Hb, Ht, MCV, MCH, MCHC, PLT, MPV без дифференцировки лейкоцитов.
II класс - автоматические гематологические анализаторы, определяющие до 20 параметров, включая расчетные показатели красной крови и тромбоцитов, гистограммы распределения лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов по объему, а так же частичную дифференцировку лейкоцитов на три популяции - лимфоциты, средние клетки и гранулоциты.
III класс - высокотехнологичные гематологические анализаторы, позволяющие проводить развернутый анализ крови, включая полную дифференцировку лейкоцитов по 5-ти параметрам (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты), гистограммы распределения лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов по объему, скетограммы.
В основе работы анализаторов 1-го и 2-го классов лежит кондуктометрический метод.
Анализаторы 3-го класса используют комбинации различных методов для подсчета клеток и дифференцировки лейкоцитов.
Кондуктометрические счетчики
Технология автоматического подсчета клеток была разработана в 1947 г. Wallace H. и Joseph R. Coulter. Апертуро-импедансный метод (метод Культера или кондуктометрический метод) основан на подсчете числа и определении характера импульсов, возникающих при прохождении клеток через отверстие малого диаметра (апертуру), по обе стороны которого расположены два изолированных друг от друга электрода. Если через узкий канал, заполненный электро-проводящим раствором, проходит клетка крови, то в этот момент сопротивление электрическому току в канале слегка возрастает и хотя это изменение невелико, современные электронные приборы легко его улавливают. Каждое событие - прохождение клетки через канал, сопровождается появлением электрического импульса. Чтобы определить концентрацию клеток достаточно пропустить определенный объем пробы через канал и сосчитать число электрических импульсов, которые при этом генерируются.
Если в один момент в канале находятся две клетки, то все равно получается только один импульс, и это приведет к ошибке подсчета клеток. Во избежание этого, необходимо развести пробу крови до такой концентрации, при которой в канале датчика всегда будет не больше одной клетки.
Высокотехнологичные гематологические анализаторы
Эти гематологические анализаторы способны осуществлять дифференцированный счет лейкоцитов по 5-ти основным категориям: нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты. Кроме того данные приборы обладают системой "сигналов тревоги", предупреждающей оператора о наличии в исследуемых образцах крови патологических клеток. Принципы, положенные в основу пятичленной дифференцировки лейкоцитов, различаются у разных производителей.
Трехмерный анализ дифференцировки лейкоцитов - VCS
VCS-технология является запатентованным методом дифференцировки лейкоцитов в анализаторах фирмы Bekman-Coulter (США-Франция).
Технология VCS (Volume - Conductivity -Scatter) включает в себя одновременный компьютерный анализ клеток по трем направлениям:
объем (Volume)
электропроводность (Conductivity)
дисперсия лазерного света (Scatter).
Основные характеристики, оцениваемые данным методом:
Объем клеток определяется сопротивлением (импеданс) для тока низкой частоты
Величина и плотность внутренних структур клетки определяет электропроводность клеток для тока высокой частоты
Комбинированную информацию о размере клеток, ее гранулярности, поверхностной топографии несет отражение, поглощение и рассеивание лазерного луча
Полученные по трем каналам данные с помощью электроники комбинируются и анализируются, в результате чего происходит распределение клеток по дифференцировочным кластерам и, таким образом, лейкоциты разделяются на пять основных популяций: лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы и базофилы.
Изменение дисперсии лазерного света клетками - MAPSS технология.
В системах Cell-Dyn фирмы Abbot (США), Sysmex (SF 3000) для дифференцировки лейкрцитов применена технология MAPSS - мультипараметрическая система лазерного светорассеивания - регистрация интенсивности рассеивания клетками поляризованного лазерного луча под разными углами. Рассеивание клеткой поляризованного лазерного луча под разными углами дает сведения о таких ее свойствах как:
размер клеток - для чего оценивается прохождение поляризованного лазерного луча под малым углом рассеивания (0°),
структура и степень сложности клеток - оценивается по анализу рассеивания поляризованных лазерных лучей, направленных под углом до 7°,
ядерно-цитоплазматическое соотношение - оценивается по анализу рассеивания поляризованных лазерных лучей, направленных под углом до 10°,
оценка формы клеточного ядра - осуществляется благодаря анализу светорассеивания поляризованных лазерных лучей под углом 90°,
для оценки клеточной зернистости и дифференцировки эозинофилов используется оценка светорассеивания деполяризованного луча под углом в 90°.
Измерение активности пероксидазы в лейкоцитах - PEROXchannel
В приборах фирмы Bayer (Technicon серии Н, ADVIA) разработан принцип жидкостной цитохимии - реакции на пероксидазу.
Использование данной реакции связано с различной активностью ее в лейкоцитах. Так, эозинофилы и нейтрофилы имеют интенсивную пероксидазную активность, моноциты - слабую, в лимфоцитах она не выявляется.
Приборы одновременно измеряют абсорбцию и дисперсию видимого света.
Основные показатели, получаемые с помощью гематологических анализаторов и факторы, влияющие на их значение
WBC (white blood cells) - количество лейкоцитов крови (х109/л). Коэффициент вариации (CV) при автоматическом определении этого показателя составляет 1-3%, в то время как при ручном подсчете 6,5-15% в зависимости от числа лейкоцитов. Измерение лейкоцитов проводится после полного лизиса эритроцитов в пробе.
RBC (red blood cells) - количество эритроцитов крови (х1012/л). Подсчет эритроцитов осуществляется в цельной крови (содержащей помимо эритроцитов еще и тромбоциты и лейкоциты). Поэтому измерению эритроцитов должно предшествовать соответствующее разведение крови для уменьшения интерференции со стороны лейкоцитов. Кроме того, при увеличении числа лейкоцитов ошибка оценки эритроцитов прогрессивно нарастает, при лейкоцитозе более 50х109/л может искажаться показатель объема эритроцитов (MCV) . Коэффициент вариации для данного параметра составляет 1-2% , а для некоторых приборов - менее 1%.
HGB (hemoglobin) - концентрация гемоглобина (г/дл или г/л) в большинстве гематологических анализаторах определяется спектрофотометрически гемиглобинцианидным методом. Коэффициент вариации при этом не превышает 2% .
НСТ (hematocrit) - гематокрит. В автоматических анализаторах крови НСТ представлен суммой прямо измеренных объемов эритроцитов в единице объема крови и проблемы "остаточной" плазмы не существует. Коэффициент вариации для автоматического метода - менее 1% , в сравнении с 1-2% при определении показателя методом центрифугирования.
MCV (mean corpuscular volume) - средний объем эритроцита, выражается в кубических мик-рометрах (мкм3) или в фемтолитрах(1фл = 1мкм3). MCV определяется большинством гематологических анализаторов благодаря прямой зависимости амплитуды электрического импульса от объема клетки. Вычисляется MCV делением суммы клеточных объемов на число эритроцитов.
В то же время MCV - это средний показатель объема всей популяции клеток. Поэтому необходимо иметь в виду, что MCV может иметь нормальное значение при наличии у пациента одновременно выраженного макро- и микроцитоза. В этом случае особую диагностическую важность приобретает анализ гистограмм.
МСН (mean corpuscular hemoglobin) - среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (пг). Характеризует среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците в абсолютных единицах. Изменения МСН лежат в основе разделения анемий на нормо-, гипо- и гиперхромные. МСН - более объективный параметр, чем цветовой показатель, который не отражает синтез гемоглобина и его содержание в эритроците.
МСНС (mean corpuscular hemoglobin concentration) - средняя концентрация гемоглобина в эритроците (г/дл). Показатель МСНС отражает истинное насыщение эритроцита гемоглобином, поскольку величина среднего содержания гемоглобина в эритроците (МСН) зависит от объема клетки, а МСНС нет.
Снижение значения МСНС наблюдается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением синтеза гемоглобина. Увеличение же параметра МСНС выше нормальных значений свидетельствует об ошибках, допущенных при измерении данной пробы (погрешности определения гемоглобина или MCV), т.к. превышение концентрации гемоглобина выше определенного физиологического уровня привело бы к разрушению (гемолизу) эритроцитов, чего не наблюдалось в данной пробе. Таким образом, данный параметр может быть использован как индикатор ошибок, допущенных на аналитическом или преаналитическом этапах работы.
RDW (red cell distribution width) - показатель гетерогенности эритроцитов по объему, характеризует степень анизоцитоза. RDW определяет величину колебания эритроцитов по объему, по этому параметру анизоцитоз улавливается прибором значительно быстрее, чем при визуальном просмотре мазка крови. Оценка степени анизоцитоза под микроскопом сопровождается целым рядом ошибок. При высыхании в мазках диаметр эритроцитов уменьшается на 10-20%. В толстых препаратах он меньше, чем в тонких. В то же время показатель RDW характеризует колебания объема клеток внутри популяции и не связан с абсолютной величиной объема эритроцитов. Поэтому при наличии в крови популяции эритроцитов с измененным, но достаточно однородным размером (например, микроциты), значения RDW могут быть в пределах нормы (11,5-14,5%).
PLT (platelet) - количество тромбоцитов (х109/л). В отличие от ручного подсчета тромбоцитов, где проводится предварительный лизис эритроцитов, автоматические счетчики крови анализируют тромбоциты и эритроциты в одной камере без предварительной обработки. Это создает проблему дифференцирования больших форм тромбоцитов (макротромбоцитов) и сравнимых с ними по объему эритроцитов (микроцитов), их фрагментов (шизоцитов), а также отшнуровавшихся фрагментов цитоплазмы лейкоцитов (клеточный дебрис).
MPV (mean platelet volume) - средний объем тромбоцитов выражается в фемтолитрах (фл) или мкм3. В норме этот показатель варьирует от 7,4 до 10,4 фл и имеет тенденцию к увеличению с возрастом: с 8,6 - 8,9 фл у детей 1-5 лет до 9,5-10,6 фл у людей старше 70 лет. "Молодые" кровяные пластинки имеют больший объем, поэтому при ускорении тромбоцитопоэза средний объем тромбоцитов возрастает. Увеличение среднего объема тромбоцитов наблюдается при идиопатической тромбоцитопенической пурпуре, гипертиреозе, атеросклерозе, сахарном диабете, у курильщиков и лиц, страдающих алкоголизмом. Преходящая макротромбоцитемия описана у рабочих, контактирующих с асфальтовыми испарениями, лиц, работающих с ракетным топливом. Крупные тромбоциты с аномальной морфологией появляются при миелопролиферативных заболеваниях. Уменьшение этого показателя отмечается после спленэктомии и при синдроме Вискотта-Олдрича. В течение первых двух часов после взятия крови с ЭДТА происходит набухание тромбоцитов с изменением их объема и соответственно увеличение MPV.
PDW (platelet distribution width) - ширина распределения тромбоцитов по объему измеряется в процентах (коэффициент вариации тромбоцитометрической кривой) и количественно отражает гетерогенность популяции этих клеток по размерам (степень анизоцитоза тромбоцитов). В норме этот показатель составляет 10-20%. Изменяется при миелопролиферативных заболеваниях.
РСТ (platelet crit) - тромбокрит) является параметром, который отражает долю объема цельной крови, занимаемую тромбоцитами, выражается в процентах. В норме тромбокрит составляет 0,15-0,40%.
Диагностическое значение этих тромбоцитарных индексов в настоящее время не определено.
Loading...